一、什么是蛋白酶K?
蛋白酶K(Proteinase K)是一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關(guān)的絲氨酸蛋白酶,基因序列來(lái)源于白色念球菌白色念球菌(Tritirachium album limber),具有很高的比活性。用于mRNA和DNA與蛋白質(zhì)的分離。
二、它有什么作用?
蛋白酶K在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前的處理,它具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用,以增加探針與靶核酸結(jié)合的機(jī)會(huì)提高雜交信號(hào)。但蛋白酶K的濃度過(guò)高、消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或孵育溫度過(guò)高時(shí)都會(huì)對(duì)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)有一定的破壞,導(dǎo)致組織切片的脫落細(xì)胞核的消失,從而影響雜交結(jié)果。EDTA緩沖液可以替代蛋白酶K的作用解決上述出現(xiàn)的問題,并能達(dá)到理想的染色效果。
三、他的用途及應(yīng)用
1.蛋白酶K可用于質(zhì)粒或基因組DNA、RNA的分離,是DNA提取的重要試劑;
2.對(duì)于xg病毒亦可裂解病毒釋放核酸,消除核酸分解酶(RNase)以防止病毒的RNA降解。并且可以滅活病毒,讓病毒的蛋白變性,失去活性而“死掉”,不再有傳染性,提高運(yùn)輸和檢測(cè)階段的安全性;
3.同時(shí)蛋白酶K也能夠應(yīng)用到皮革工業(yè)、肉類嫩化、滅活生活以及工業(yè)用水中的細(xì)菌,優(yōu)點(diǎn)是消毒劑本身無(wú)害,而且不產(chǎn)生有害消毒產(chǎn)物,所以這是一種高效環(huán)保的方法。
四、如何存放
保存:保存在-20℃冰箱里,避免反復(fù)凍融,有效保證12月。
使用方法:孵育溫度為55至65℃,理想孵育溫度為58℃,孵育時(shí)間為15分鐘至48小時(shí);理想孵育時(shí)間為2小時(shí)。
貨號(hào) | 名稱 | 品牌 | 規(guī)格/純度 |
AS70874 | 蛋白酶K | AMEKO | 30u/mg |
RC21066 | 蛋白酶K溶液 | AMEKO | 20mg/ml |
RC21328 | 蛋白酶K緩沖液 | AMEKO | 100mL |
1245680100 | 蛋白酶K | Merck | 40u/mg |
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